Вакцина сухая культуральная ВНИВИП против вирусного энтерита гусей
Общие сведения.
По внешнему виду вирусвакцина представляет собой сухую однородную пористую массу бледно-розового или бледно-желтого цвета, легко растворимую в воде. Вакцина расфасована по 4,5 см3 (90), 6,0 см3 (120) прививных доз в стеклянные флаконы соответствующей вместимости. Флаконы вакуумированы или заполнены инертным газом, герметично укупорены резиновыми пробками, укрепленными алюминиевыми колпачками.
Биологические свойства.
Вирусвакцина сухая культуральная ВНИВИП против вирусного энтерита гусей — иммунобиологический лекарственный препарат. Вирусвакцина вызывает формирование иммунного ответа к вирусному энтериту у гусят через 10 дней после однократного, а у взрослого поголовья — через 21 день после двукратного применения, который сохраняется в течение 4-6 месяцев. Одна иммунизирующая доза содержит не менее 5.0 lg ТЦД50/см3 вируса энтерита гусей («Клон-6» штамма «П-75»). Вирусвакцина безвредна, лечебными свойствами не обладает.
Порядок применения.
Вакцинации подлежат гуси родительского стада за 40-50 суток до начала сезона яйцекладки, двукратно с интервалом 20 суток. Гусят, полученных от невакцинированных птиц родительского стада, вакцинируют в 10-15 — суточном возрасте и ревакцинируют перед яйцекладкой. Вирусвакцину вводят внутримышечно (в область бедра) взрослым гусям в объеме 1,0 см3 , а гусятам — 0,5 см3 . Содержимое флакона растворяют в стерильном физиологическом (0,9%) растворе из расчета 1,0 см3 на одну дозу препарата.
Условия хранения.
Срок годности вакцины 12 месяцев с даты выпуска, при соблюдении условий хранения и транспортирования в темном месте при температуре от 2 до 8о С. Вакцину следует использовать в течение 8 часов после вскрытия. По истечению срока годности вакцина к применению не пригодна.
Регистрационное удостоверение
Инструкция по применению
Международное непатентованное или химическое наименование:
Вирусвакцина сухая культуральная ВНИВИП против вирусного энтерита гусей
Держатель регистрационного удостоверения:
ФГБНУ ВНИВИП, 198412, г. Санкт-Петербург, г. Ломоносов, ул. Черникова, д. 48
Разработчик:
ФГБНУ ВНИВИП, 198412, г. Санкт-Петербург, г. Ломоносов, ул. Черникова, д. 48
Производитель:
ФГБНУ ВНИВИП, 198412, г. Санкт-Петербург, г. Ломоносов, ул. Черникова, д. 48
Лекарственная форма:
лиофилизат для приготовления раствора для подкожного и внутримышечного применения
Качественный состав и количественный состав действующих веществ и качественный состав вспомогательных веществ:
культуральная жидкость культуры фибробластов эмбрионов гусей, инфицированных аттенуированным вирусом энтерита гусей («Клон 6 штамма «П-75») с добавлением стабилизатора- сахарозы, желатина и пептона, консервантов- бензилпенициллина и стрептомицина сульфата=
Дозировка:
4,5 см3 (90 прививных доз); 6 см3 (120 прививных доз)
Количество в потребительской упаковке:
по 4,5 см3 (90 прививных доз); 6,0 см3 (120 прививных доз) во флаконах
Изобретение относится к области ветеринарии и птицеводству. Предложена вакцина, содержащая инактивированный димерэтиленимином антиген парвовируса гусей Штамма Goosa Parvovirus ВГНКИ № 71, клон 6 с активностью не менее 6,5-7,5 lg ТЦД50 /см3 в смеси с масляным адъювантом Монтанид ISA-70, взятые в соотношении 1:1-1:4, причем концентрация димерэтиленимина составляет не менее 0,1%. Способ вакцинации против парвовирусной инфекции гусей включает внутримышечное введение вакцинного препарата птице родительского стада однократно за 30 суток до предполагаемой яйцекладки в дозе 2,5·104-1,5·105 ТЦД50/см3. Вакцинный препарат безвреден для птицы, обладает выраженной антигенной и иммуногенной активностью, вызывает напряженный длительный иммунитет у гусей на весь репродуктивный период, однократное применение инактивированного препарата более технологично и экономично, уменьшает стрессы и нагрузку на иммунную систему птицы. 2 н.п. ф-лы, 2 табл.
Формула изобретения
1. Вакцина против парвовирусной инфекции гусей, содержащая инактивированный парвовирусный антиген и адъювант, отличающаяся тем, что содержит инактивированный димерэтиленимином антиген парвовируса гусей Штамма «Goosa Parvovirus ВГНКИ № 71 клон 6» с активностью 6,5-7,5 lg ТЦД50 /см3 в смеси с масляным адъювантом Монтанид ISA-70, взятые в соотношении 1:1-1:4, причем концентрация димерэтиленимина составляет не менее 0,1%.
2. Способ вакцинации против парвовирусной инфекции гусей путем введения вакцинного препарата в организм птице, отличающийся тем, что в качестве вакцинного препарата используют вакцину, полученную по п.1, которую вводят птице родительского стада однократно за 30 сут до предполагаемой яйцекладки внутримышечно в дозе 2,5·104-2,5·105 ТЦД 50/см3.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, в частности к производству вакцин для специфической профилактики парвовирусной инфекции гусей (вирусного энтерита гусей), а также к способам лечения и профилактики этого заболевания.
Парвовирусная инфекция гусей (вирусный энтерит гусей) — острая контагиозная болезнь молодняка гусей и мускусных уток, характеризующая поражением желудочно-кишечного тракта, печени, сердца, поджелудочной железы и других паренхиматозных органов, и сопровождается высокой смертностью (от 30 до 100%). Возбудителем является парвовирус, который относится к семейству Parvoviridae.
Болезнь широко распространена в европейских странах (Германия, Франция, Англия, Венгрия, Чехословакия) и на других континентах. В Российской Федерации она зарегистрирована во многих хозяйствах различных зон.
Наиболее эффективным способом борьбы против ПВИ гусей является вакцинопрофилактика наряду с применением цитратной крови и сыворотки крови гусей реконвалесцентов и гипериммунных сывороток, полученных на различных биологических моделях.
Известна вакцина против вирусного энтерита гусей и способ профилактики вирусного энтерита гусей (1).
Вакцина содержит культуральную жидкость, штамм вируса Goosa parvovirus ВГНКИ № 71, клон 6 с биологической активностью 106,0 -107 ТЦД50 и защитную среду высушивания при соотношении культуральной жидкости и защитной среды 1:1-1,0:1,5. Способ профилактики заболевания предусматривает введение предлагаемой вакцины гусятам 1-2-суточного возраста в дозе 50-70 тыс. ТЦД 50 в 0,50-0,75 см3 или взрослым гусям двукратно, за 50-30 суток до начала яйцекладки в дозе 75-100 тыс. ТЦД 50 в 0,75-1,00 см3.
Однако эта вакцина даже при двукратном применении не создает длительного напряженного иммунитета у птиц на весь репродуктивный период.
Известна разработанная в Институте птицеводства УААН инактивированная вакцина против вирусного энтерита гусей (2). Однако данная вакцина содержит патогенный штамм парвовируса ХМ-99, выделенный в Украине. К тому же, при разработке схемы вакцинации родительских стад гусей с использованием данного инактивированного биопрепарата его испытывали как в сочетании с живой вакциной (через 14 дней после прививки живой вакциной), так и самостоятельно, применяя однократно или двукратно с интервалом в 14 дней. Однако для подтверждения иммунизаторного эффекта от применения одно- или двукратной прививки инактивированной вакциной необходимы, по мнению авторов, дальнейшие исследования.
Известна вакцина против вирусного заболевания гусей, вызываемого парвовирусом, являющаяся прототипом заявленного изобретения, которая содержит патогенный вирус, инактивированный -пропиолактоном, что не исключает возможности его реактивации (3).
Задачей, решаемой в рамках заявленной группы изобретений, является создание инактивированной вакцины против парвовирусной инфекции гусей, применяемой в условиях промышленного гусеводства, фермерских хозяйств, создающей длительный напряженный иммунитет у гусей родительского стада на весь репродуктивный период, а также экономичного и технологичного способа вакцинации против парвовирусной инфекции гусей, сокращающего количество вакцинаций с целью уменьшения стрессов и нагрузки на иммунную систему птицы при одновременном сохранении безвредности, антигенной активности и длительности хранения вакцинного препарата.
Поставленная задача решена путем создания вакцины, содержащей инактивированный димерэтиленимином антиген парвовируса гусей Штамма Goosa Parvovirus ВГНКИ № 71, клон 6 с активностью 6,5-7,5 lg ТЦД50/см 3 в смеси с масляным адъювантом Монтанид ISA-70, взятых в соотношении 1:1-1:4, причем концентрация димерэтиленимина составляет не менее 0,1%.
Способ вакцинации против парвовирусной инфекции гусей включает внутримышечное введение заявленного вакцинного препарата птице родительского стада однократно за 30 суток до предполагаемой яйцекладки в дозе 2,5·104-2,5·10 5 ТЦД50/см3. Как правило, показанием к применению вакцины является неблагополучие в хозяйствах по парвовирусной инфекции гусей.
Штамм Goosa parvovirus ВГНКИ № 71, клон 6 используется для приготовления вакцинных препаратов против вирусного энтерита гусей (4).
Штамм депонирован в коллекции ВГНКИ ветеринарных препаратов под номером 71. Вакцинный штамм № 71 получают методом селекции. Штамм имеет следующие морфологические, физиологические и культуральные характеристики.
Вирионы являются мелкими сферическими с размером 20±2 нм, нуклеокапсид содержит ДНК. В культуре клеток под агаровым покрытием индуцируется образование бляшек с ровными краями размером 1-2 мм. Вирус репродуцируется в культуре клеток гусиных эмбрионов, вызывая острую форму инфекции с выраженным цитопатическим эффектом через 3-4 суток в титрах 6,5-7,0 логарифма ТЦД50/05 мл. Штамм апатогенен для развивающихся гусиных эмбрионов, гусят, лабораторных млекопитающих при парэнтеральном введении в дозах, в 100 раз превышающих вакцинальную, не обладает гемагглютинирующей и гемадсорбирующей активностью, устойчив к воздействию эфира и хлороформа, выдерживает температуру 60°C в течение 60 минут, имеет полное антигенное родство с вирулентным вирусом, вызывающим заболевание в гусеводческих хозяйствах.
Содержание и количественное соотношение ингредиентов в вакцине диктуется ее функциональными особенностями.
Изменение соотношения антигена и адъюванта в сторону увеличения количества антигена влечет за собой сокращение срока хранения вакцины и перерасход антигена, что экономически не выгодно. При большем содержании адъюванта по отношению к антигену снижается активность вакцины и вырабатывается недостаточный для защиты от заболевания иммунитет.
Для получения вакцины компоненты, входящие в ее состав, смешивают в гомогенизаторе в течение 5-10 минут при скорости 3000 об/мин.
Вакцина представляет собой однородную эмульсию розовато-беловатого цвета с высокой стабильностью в процессе хранения при t=+(2-8)°C.
Заявленный способ вакцинации птиц заключается во введении вышеупомянутой инактивированной вакцины в организм птицы внутримышечно однократно в дозе 2,5·104-2,5·105 ТЦД 50/см3.
Как правило, показанием к применению вакцины является неблагополучие по парвовирусной инфекции гусей. Вакцинируют всю клинически здоровую птицу родительского стада за 30 сут перед началом репродуктивного периода. Препарат вводят внутримышечно в объеме 0,5 см3/голову.
Сущность и практическая применимость заявленной группы изобретений иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1: Приготовление инактивированной вакцины в различных соотношениях 1:4; 1:2,33; 1:1,5; 1:1
Вакцину против парвовирусной инфекции гусей готовят по стандартной методике получения инактивированных эмульсионных препаратов. К 100 объемам инактивированного антигена добавляют 400, 233, 150 и 100 объемов масляного адъюванта Монтанид ISA-70 соответственно. Полученная смесь тщательно перемешивается и разливается во флаконы, хранится при температуре +(2-8)°C.
Вакцину использовали для профилактики парвовирусной инфекции гусей в условиях опытной базы ГНУ ВНИВИП.
Иммуногенную активность контролировали путем выявления специфических антител к парвовирусу гусей в реакции нейтрализации и методом иммуноферментного анализа согласно Методическим указаниям по лабораторной диагностике вирусного энтерита (парвовирусной инфекции) гусей методом иммуноферментного анализа (5, 6).
Полученные результаты испытаний представлены в таблице 1.
| Таблица 1 | ||||||
| Влияние соотношения Аг:Ад на иммунологические показатели вакцины (титр антител в ИФА) | ||||||
| № п/п | Кол-во птиц | Соотношение Аг:Ад | Титр антител до вакцинации | Титр антител после вакцинации на (сут) | Иммунная птица, % | |
| 28 | 42 | |||||
| 1 | 10 | 1:4 | 414±31 | 3521±67 | 3476±136 | 80 |
| 2 | 10 | 1:2,33 | 414±31 | 11299±92 | 10220±61 | 100 |
| 3 | 10 | 1:1,5 | 414±31 | 12050±132 | 11825±125 | 100 |
| 4 | 10 | 1:1 | 414±31 | 1200±142 | 10382±252 | 100 |
| 5 | 5 | контроль | 414±31 | 414±31 | 414±31 | 0 |
| Примечание: Аг — антиген; Ад — адъювант |
Как следует из приведенных результатов, оптимальным является соотношение антигена и адъюванта 1:2,33. Препарат безвреден для птицы, обладает выраженной антигенной и иммуногенной активностью.
Пример 2
Полученную вакцину использовали в условиях опытной базы ГНУ ВНИВИП. Для профилактики парвовирусной инфекции гусей вакцинный препарат вводили в объеме 0,5 см3/голову однократно в дозе 2,5·104-2,5·105 ТЦД50 /см3 внутримышечно в организм птицы родительского стада за 30 суток до начала репродуктивного периода. Полученные результаты испытаний представлены в таблице 2.
| Таблица 2 | ||||||
| Воздействие различных доз вакцины на иммунологические показатели | ||||||
| № п/п | Кол-во птиц | Доза вакцины, ТЦД50/0,5 см3 | Титр антител в ИФА* | Иммунная птица, % | ||
| до вакцинации | через 28 сут после вакцинации | через 42 сут после вакцинации | ||||
| 1 | 10 | 2,5·104 | 414±31 | 7011±67 | 8671±41 | 100 |
| 2 | 10 | 2,5·104,5 | 414±31 | 9030±72 | 8390±82 | 100 |
| 3 | 10 | 2,5·105 | 414±31 | 11299±92 | 10220±61 | 100 |
| 4 | 10 | контроль | 414±31 | 414±31 | 414±31 | 0 |
| Примечание: * — значение титров в обратных величинах |
Как следует из приведенных данных, вакцина в испытанных дозах вызывает напряженный иммунитет у гусей.
Препарат в 5-кратной дозе (2,5 см 3/гол.) безвреден для птицы. Однократное применение инактивированной вакцины по сравнению с живой вирусвакциной (1) более экономично и технологично и вызывает длительный иммунитет на весь период яйцекладки.
Источники информации
1. Патент Российской Федерации № 2118539, 10.09.1998.
2. Разработка схемы вакцинации гусей против вирусного энтерита с использованием инактивированной вакцины /А.В.Белецкая и др. // Достижения в современном птицеводстве: исследования и инновации. Материалы XVI конференции ВНАП. Сергиев Посад, 2009. — С.336-337.
3. Патент Франции № 7406981, 1974.
4. SU № 1499917, 15.10.1994.
5. Методические указания для лабораторной диагностики вирусного энтерита (парвовирусной инфекции) гусей методом иммуноферментного анализа / Б.Б.Трефилов, Н.В.Никитина, Д.В.Маслов. — СПб., 2005. — С.12.
6. Патент Российской Федерации № 2323743, 10.12.2007.
Вакцина против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного, коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак – МУЛЬТИКАН-8.
Вакцина состоит из сухого и жидкого компонентов:
- сухой компонент (живая вакцина) изготовлен из аттенуированных производственных штаммов вируса чумы собак, аденовируса собак типа 2, парвовируса и коронавируса собак;
- жидкий компонент (инактивированная вакцина) изготовлен из производственных инактивированных штаммов лептоспир серогрупп Icterohaemorrhagiae, Canicola и Grippotyphosa, производственного инактивированного штамма вируса бешенства с адъювантом.
Жидкий компонент является растворителем сухого компонента вакцины.
Применение
Вакцина МУЛЬТИКАН-8 предназначена для профилактики чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов, лептоспироза и бешенства собак.
Запрещено вакцинировать клинически больных и/или ослабленных животных.
Метод вакцинации
Вакцину вводят щенкам двукратно в 8 – 10-недельном возрасте с интервалом 21 – 28 сут. внутримышечно в область бедра в дозе 2,0 мл. Ревакцинацию щенков проводят в возрасте 10 – 12 месяцев. Собак мелких и декоративных пород прививают в дозе 1 мл. Взрослых собак вакцинируют один раз в год в дозе 2 мл.
Сухой компонент вакцины растворяют в 2 мл прилагаемого жидкого компонента. При применении исключают выпадение компонентов вакцины в осадок. При наличии незначительного не разбивающегося осадка вакцину 3 – 5 раз пипетируют во флаконе с помощью шприца до получения равномерной гомогенной суспензии.
Вакцинацию проводят с соблюдением правил асептики, для инъекции используют только стерильные материалы и инструменты.
Иммунитет
Вакцина вызывает формирование иммунного ответа у собак к чуме, аденовирусным инфекциям, парвовирусному, коронавирусному энтеритам, лептоспирозу и бешенству через 2 – 3 недели после иммунизации, продолжительностью у молодняка 6 – 8 месяцев, у взрослых – 12 – 15 месяцев.
Вакцина безвредна и ареактогенна, лечебными свойствами не обладает.
Форма выпуска
Сухой и жидкий компоненты вакцины расфасованы соответственно по 1,0 см3 (1 доза) и 2,0 мл (1 доза) во флаконы или ампулы вместимостью 3,0 мл.
Срок годности
18 месяцев при соблюдении условий хранения и транспортирования (в сухом темном месте, при температуре от 2 до 8 °С).
Перед использованием вакцины необходимо внимательно ознакомится с инструкцией по применению.